牛布魯氏桿菌PCR試劑盒

商品名稱：牛布魯氏桿菌PCR試劑盒

Name     ：Brucella Bovis PCR Kit

牛布魯氏桿菌（Brucella bovis，又叫Brucella abortus）又叫流產布氏桿菌，是一種革蘭氏陰性的不運動細菌，無莢膜（光滑型有微莢膜），觸酶、氧化酶陽性絕對嗜氧菌，可還原硝酸鹽，細胞內寄生，可以在牛體內存活，也能引起人類疾病。一頭奶牛如果感染布魯氏桿菌，沒有得到及時的清潔和防疫，布病很快會在牲畜群體里暴發，進而增加人被感染的幾率。其特點是生殖器官、胎膜及多種器官組織發炎、壞死和肉芽腫的形成，引起流產、不孕、睪丸及關節炎等癥狀。感染人后可能導致多個器官或臟器系統，骨骼或關節的病變，感染組織中可觀察到具有組織學特征的肉芽腫。晚期可能失去勞動能力、臥床不起、出現神經或精神病方面的癥狀。因此牛布魯氏菌的檢測具有重要的意義。本試劑盒根據PCR原理開發，它具有下列特點：

1.   即開即用，用戶只需要提供細菌DNA模板。

2.   引物經過精心優化，專一性強，只擴增牛布魯氏桿菌。

3.   提供陽性對照，便于區分假陰性樣品。

4.   PCR mix中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。

5.   本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次。

6.   本產品只能用于科研。

【試劑組成】

說明：不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

【儲存條件及有效期】

低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其他試劑。

【自備試劑】

樣品DNA。

【使用方法】

一、樣品DNA的制備

1.   如果有N個樣品，必須設置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。

1.   用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數細菌DNA提取/試劑盒兼容。本試劑盒免費贈送20次免DNA提取的核酸釋放劑，本產品的裂解液可以直接作為PCR模板，省略了DNA提取步驟。其使用手冊可咨詢本公司客服索取。

二、設置PCR反應（40 μL體系）

2.   對N+2個樣品，在PCR時需要增加一個PCR陽性對照和一個PCR陰性對照，故需要設置N+4個反應。在N+4個PCR管中分別加入下列成分：

3.  按下表設置PCR反應：

三、電泳檢測

取10-20 μL PCR產物。電泳檢測PCR產物。本產品提供的PCR Mix在擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加loading buffer。預期的PCR產物長度為450bp。陽性對照必須有此條帶出現，陰性對照必須無任何擴增，否則實驗無效。對沒有擴增產物的樣品，可以稀釋10倍后重復PCR擴增以排除PCR抑制劑的感染。